ELISA

El ELISA (acrónimo del inglés Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, lit. ‘ensayo por inmunoadsorción ligado a enzimas’) es un ensayo bioquímico analítico de uso común, descrito por primera vez por los suecos Eva Engvall y Peter Perlmann en 1971.​ El ensayo es un tipo de inmunoensayo enzimático (EIA) de fase sólida que detecta la presencia de un ligando (generalmente una proteína) en una muestra líquida mediante anticuerpos dirigidos contra el ligando que se va a medir. El ELISA se ha utilizado como herramienta de diagnóstico en medicina, fitopatología y biotecnología, así como para el control de calidad en diversas industrias. En la forma más simple de un ELISA, los antígenos de la muestra a analizar se fijan a una superficie. A continuación, se aplica un anticuerpo específico sobre la superficie para que se una al antígeno. Este anticuerpo se une a una enzima, y posteriormente se eliminan los anticuerpos no unidos. En el último paso, se añade una sustancia que contiene el sustrato de la enzima. Si se produce la unión, la reacción subsiguiente genera una señal detectable, generalmente un cambio de color. La realización de un ELISA requiere al menos un anticuerpo con especificidad para un antígeno determinado. La muestra, con una cantidad desconocida de antígeno, se inmoviliza en un soporte sólido (generalmente una placa microtituladora de poliestireno) de forma no específica (vía adsorción a la superficie) o específica (vía captura mediante otro anticuerpo específico para el mismo antígeno, en un ELISA tipo sándwich). Una vez inmovilizado el antígeno, se añade el anticuerpo de detección, que forma un complejo con el antígeno. El anticuerpo de detección puede unirse covalentemente a una enzima o bien puede detectarse mediante un anticuerpo secundario unido a una enzima por bioconjugación. Entre cada paso, la placa se lava con una solución detergente suave para eliminar las...